易賽騰生物（Ecyton）研究團隊利用其開(kāi)發(fā)的先進(jìn)直接轉分化技術(shù)，成功制備出能夠在21天內快速展示阿爾茨海默?。?/span>AD）關(guān)鍵天然病理特征的人源基底前腦膽堿能神經(jīng)元（BFCN）。通過(guò)該模型，團隊對比分析了Aducanumab（Adu）和Lecanemab（LCN）兩種FDA批準的單克隆抗體藥物，發(fā)現LCN在清除神經(jīng)細胞內淀粉樣β蛋白和減少Tau蛋白磷酸化方面顯著(zhù)優(yōu)于Adu。這一發(fā)現支持LCN在臨床上的優(yōu)越性，為AD治療藥物的研發(fā)提供了重要的科學(xué)依據，并展示了天然病理性BFCN在AD研究及藥物評估中的潛力。

阿爾茨海默?。ˋD）是一種以大腦中淀粉樣斑塊積累和磷酸化Tau蛋白形成神經(jīng)原纖維纏結為特征的神經(jīng)退行性疾病。原代培養人源神經(jīng)細胞的來(lái)源有倫理限制、獲取技術(shù)難度大，不具有擴增能力，且成體神經(jīng)細胞難以在體外培養使用，這些特性給AD的病理機制研究和藥物開(kāi)發(fā)帶來(lái)了巨大挑戰。

Ecyton研究團隊致力于構建穩定可靠的人源AD神經(jīng)細胞模型，并基于這些模型建立藥物篩選和驗證平臺。該團隊最近取得的進(jìn)展顯示，通過(guò)特定轉錄因子的過(guò)表達和小分子的協(xié)同作用，成功將AD患者的皮膚成纖維細胞直接轉分化為表現AD病理特征的BFCN亞型。這一過(guò)程的特點(diǎn)包括：

1. 轉分化的高效率和速度，10天內即可將92%以上病毒感染的成纖維細胞轉化為神經(jīng)細胞；

2. 轉分化后神經(jīng)細胞的高純度，94%以上的細胞表達神經(jīng)元特有標志物；

3. 以及這些神經(jīng)細胞具有高凍存復蘇率和良好的鋪板效率。在優(yōu)化條件下，BFCN能單獨培養超過(guò)90天并形成致密的健康神經(jīng)網(wǎng)絡(luò )，無(wú)需與星形膠質(zhì)細胞共培養。

Ecyton快速制備的患者AD-BFCN在21天內展示了AD相關(guān)的天然內源性病理特征，包括神經(jīng)元內Aβ42的積累和聚集以及pTau181的聚集，如圖1。在老年健康對照HC-BFCN（66歲）中，Aβ42在培養期間保持較低且穩定的水平。相比之下，AD-BFCN中Aβ42的積累迅速增加，高達HC-BFCN的37倍。此外，AD-BFCN中內源性Aβ42寡聚體和原纖維的形成，表現出時(shí)間依賴(lài)性模式，并在21天時(shí)急劇增加至三倍。比較分析還顯示，pTau181在A(yíng)D-BFCN中隨時(shí)間積累，并與神經(jīng)元內Aβ42的積累和聚集密切相關(guān)，顯示與AD有更強的關(guān)聯(lián)。因此，神經(jīng)元天然內源性Aβ42和pTau181同時(shí)檢測可能作為評估AD藥物有效性的更科學(xué)可靠的指標。

Figure 1. Intracellular Amyloid and Tau Pathology in Neurons Derived from Alzheimer's Disease Patients.

Ecyton的研發(fā)團隊進(jìn)一步研究了LCN和Adu對AD-BFCN神經(jīng)元胞內Aβ42和pTau181的影響。如圖2。與對照IgG相似，LCN和Adu都能通過(guò)神經(jīng)細胞膜進(jìn)入胞內。進(jìn)入細胞后，LCN與神經(jīng)元內Aβ42聚集體及早期內體（RAB5）、晚期內體（RAB7）、溶酶體（LAMP1）和蛋白酶體（LMP7）標記共定位。定量免疫熒光分析表明，LCN在72小時(shí)內有效減少了AD-BFCN中70%的細胞內Aβ42聚集體和20%的pTau181水平。相比之下，針對纖維化Aβ42的Adu未能有效清除神經(jīng)元內的Aβ42及其聚集體，對pTau181的積累無(wú)顯著(zhù)影響。初步機制研究表明，TRIM21在減少LCN與Aβ42復合物中發(fā)揮重要作用。LCN處理AD-BFCN后，TRIM21在三天內呈現下降，與Aβ42減少一致。對AD-BFCN進(jìn)行LCN處理72小時(shí)后，接著(zhù)用自噬溶酶體融合抑制劑巴非霉素A1（BAF）或蛋白酶體抑制劑硼替佐米（BTZ）處理6小時(shí)，定量免疫熒光測定顯示，與對照組相比，抑制劑處理后Aβ42和TRIM21水平顯著(zhù)增加。結果表明，自噬溶酶體途徑和蛋白酶體途徑均參與了Aβ42-LCN-TRIM21復合物的降解。

Figure 2. Distinct Impact of LCN and Adu on Aβ42 and pTau181 in AD-BFCN.

總之，Ecyton研發(fā)團隊的這項研究為AD領(lǐng)域帶來(lái)了新的進(jìn)展，不僅加深了我們對AD發(fā)病機制的理解，也為開(kāi)發(fā)更有效的治療藥物提供了新思路和強有力的工具。這一成果將對未來(lái)的AD研究和藥物開(kāi)發(fā)產(chǎn)生積極的影響，有望為眾多AD患者帶來(lái)希望。

論文題目是“Distinct Effects of Aducanumab and Lecanemab on Intraneuronal Endogenous Aβ42 and Phosphorylated Tau in Alzheimer's Disease Treatment”。

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